变异链球菌丙氨酸消旋酶基因表达纯化及活性测定

摘要：

变异链球菌是口腔主要的龋病病原菌.丙氨酸消旋酶通过合成右旋丙氨酸(D-alanine,D-ala)参与细菌细胞壁肽聚糖的生物合成过程,与细菌性疾病密切相关,近年来成为抗菌药物的又一理想靶位.D-环丝氨酸(D-cycloserine,DCS)是丙氨酸消旋酶不可逆性抑制剂.本研究通过聚合酶链反应克隆变异链球菌UA159的smu.1834c基因,经过酶切、连接,构建重组表达质粒pET-smu.1834c,诱导表达重组,纯化蛋白.测定DCS对丙氨酸消旋酶活性的抑制作用.成功诱导表达纯化smu.1834c基因编码蛋白,具有体外催化L-丙氨酸生成D-丙氨酸的活性.发现DCS能够抑制该蛋白的活性.本研究证实变异链球菌smu.1834c基因编码丙氨酸消旋酶.DCS能够抑制其活性,并且呈现一定的剂量相关性.

关键词：变异链球菌、丙氨酸消旋酶、右旋丙氨酸、D-环丝氨酸

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资助基金：国家自然科学基金编号:81400501、81430011口腔疾病研究国家重点实验室专项经费SKLOD201525

在线出版日期：2018-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：597-600