新生SD大鼠三叉神经元细胞的体外原代培养及鉴定

摘要：

目的:建立新生SD大鼠三叉神经元细胞体外原代培养模型,为三叉神经的细胞学研究提供实验基础.方法:选取新生24 h以内SD大鼠24只,剥离脑组织,手术显微镜下分离大鼠三叉神经节,无菌剪碎后采用胰蛋白酶与DNA酶混合分次消化和机械吹打相结合的方法制备神经细胞悬液,接种于6孔板,倒置相差显微镜下观察细胞状态;免疫荧光染色鉴定神经元特异性抗原NeuN、β-tubulinⅢ的表达.结果:分离出来的三叉神经细胞4h后贴壁生长,并长出突起,随时间增加,突起变长并交错呈网络,培养至3～7 d神经细胞状态最佳,随后逐渐凋亡,体外培养的神经细胞可生长15d,无增殖传代的能力;神经元特异性抗原NeuN、β-tubulinⅢ的表达阳性.结论:胰蛋白酶与DNA酶混合分次消化法可分离出大量三叉神经元细胞,为后续的细胞学研究提供实验基础.

关键词：三叉神经元、细胞培养、免疫荧光

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资助基金：国家自然科学基金编号:81550037安徽省教育厅高校自然科学研究项目编号:KJ2017A255皖南医学院博士科研启动基金编号:WK2014RC03皖南医学院大学生科研基金WK2016S10

在线出版日期：2018-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：411-413