MiR-34a在牙周膜细胞成骨向分化中的作用

摘要：

目的:探讨微小RNA-34a在牙周膜细胞成骨向分化中的作用.方法:体外分离培养人牙周膜细胞(hP-DLCs),取第3～6代用于实验.首先,对hPDLCs进行成骨诱导液处理,在3、7、14 d后利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-34a基因的表达变化.然后,构建慢病毒载体pCDH-pre-miR-34a和pCDH,将慢病毒载体感染hPDLCs,构建pre-miR-34a过表达细胞模型(hPDLCs/34a)和空载体对照细胞模型(hPDLCs/pC-DH),并诱导hPDLCs成骨分化3、7、14和21 d.分析成骨标志基因碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)及骨涎蛋白(BSP)表达变化,ALP活性及钙化结节形成的茜素红染色情况.结果:hPDLCs经成骨分化诱导后,miR-34a基因表达在第3天开始明显升高,并呈逐渐增高趋势,差异均有统计学意义(P＜0.001).与hPDLCs/pCDH组相比,hPDLCs/34a组的ALP活性和茜素红染色均有明显减弱.qRT-PCR结果显示:hPDLCs/34a组的ALP表达量在成骨诱导7d时较hPDLCs/pCDH组降低(P＜0.05);Runx2、OCN及BSP表达量的差异在各时间点基本无统计学意义.结论:在体外条件下,miR-34a抑制人牙周膜细胞成骨向分化.

关键词：人牙周膜细胞、成骨分化、微小RNA-34a、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：33

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金编号:81200812武汉市应用基础研究计划项目2016060101010043

在线出版日期：2017-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：928-932