Naa10基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对口腔鳞癌细胞生长的影响

摘要：

目的:构建人N-α-乙酰基转移酶10(N-d-acetyltransferase 10,Naa10)基因有效的慢病毒RNAi载体并转染人口腔鳞癌细胞SCC-15,研究其对口腔鳞癌细胞生长的影响.方法:根据人Naa10基因mRNA序列设计合成3个siRNA片段,转染人口腔鳞癌SCC-15细胞株并进行验证,将最有效的干扰序列克隆至pLV-shRNA载体上,测序正确后进行包装,测定病毒颗粒滴度后,将慢病毒感染SCC-15细胞以测定Naa10的表达情况,并通过生长曲线研究干扰Naa10对SCC-15细胞生长的影响.结果:3个靶点的siNaa10均能有效抑制Naa10基因的表达,其中2号靶点最为有效(P＜0.005);重组RNAi质粒pLV-shNaa10经测序证实构建成功,pLV-shNaa10可在293T细胞中成功包装;测定病毒颗粒LV shNaa10、LV NC滴度分别为1.2×109 TU/mL和1.0×109TU/mL;SCC-15细胞感染LV-shNaa10后,Naa10蛋白表达明显降低(P＜0.005);干扰Naa10可促进人口腔鳞癌细胞SCC-15的生长.结论:成功构建了Naa10 shRNA慢病毒表达载体,感染人口腔鳞癌细胞SCC-15后,有效抑制了内源性Naa10基因的表达,干扰Naa10可促进SCC-15细胞的生长.

关键词：N-α-乙酰基转移酶10、慢病毒、RNA干扰、口腔鳞癌

所属期刊栏目：33

分类号：R739.8(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金编号:81560473,81560442,U1603117,31470827兵团基金资助项目2014BB021,2015AD003

在线出版日期：2017-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：707-711