骨形态发生蛋白7在高糖环境下对成骨细胞分化的影响

摘要：

目的:研究对于重组人骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein7,BMP7)在持续稳定高糖环境下对成骨细胞生物学性能及成骨活性的影响.方法:细胞取小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1Subclone 14,MC3T3),分为4组:正常生理糖浓度组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)为对照组,生理糖浓度+BMP7组高糖组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L,BMP7浓度为100 μg/L)(葡萄糖浓度为25 mmol/L),高糖+BMP7组(葡萄糖浓度为25mmol/L,BMP7浓度为100 μg/L).甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同条件培养后1d、3d、5d、7d后的细胞增殖情况,成骨诱导检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性.罗丹明-鬼笔环肽染色后以激光共聚焦显微镜观察MC3T3细胞骨架于BMP7作用24h后的形态变化,荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测BMP7作用48 h后成骨基因特异性转录因子2(Runx2),骨钙素(osteocalcin,OCN)、碱性磷酸酶(ALP)的mRNA表达.结果:MTT实验显示25 mmol/L葡萄糖可抑制MC3T3增殖(P＜0.05),加入BMP7后可提高细胞增值率(P＜0.05).并可上调高糖导致的ALP活性下降.细胞骨架观察结果显示,对照组细胞骨架成束状铺开,交织成网,较为均匀.高糖组细胞微丝解聚成团状,模糊不清.RT-qPCR结果显示BMP7可促进MC3T3细胞的ALP、OCN及Runx2 (P＜0.05)的表达.结论:持续稳定高糖环境能够抑制成骨细胞的增殖及ALP活性,影响细胞骨架结构,抑制成骨基因表达,添加BMP7可以在不同程度上反转该趋势,但仍较正常水平低.

关键词：骨形态发生蛋白7、成骨细胞高糖细胞骨架

所属期刊栏目：32

分类号：R782.05(口腔科学)

在线出版日期：2016-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：973-977