不同方法提取和测定粪肠球菌生物膜总蛋白含量的比较

摘要：

目的:以标准菌株ATCC33186为例,用超声破碎法提取粪肠球菌生物膜中总蛋白,结合3种不同方法测定总蛋白的含量,确定一种简单快速有效的检测细菌生物膜中总蛋白含量的方法.方法:将培养24 h的生物膜加入PBS缓冲液清洗后,使用超声破碎法提取生物膜中总蛋白,选择作用时间、振幅Amp、超声和间隔时间等参数进行超声破碎,结合SDS-PAGE凝胶电泳分析蛋白电泳图谱确定最佳超声条件后,确定最佳超声条件后,使用BCA法、考马斯亮蓝Bradford法和Lowry法测定生物膜中总蛋白含量,对结果进行比较分析.结果:最佳超声破碎条件参数:作用时间2 min,振幅Amp20％,超声2s间隔2s.用BCA法测得总蛋白含量每皿为2299.1μg,考马斯亮蓝Bradford法测得含量为每皿3793.8 μg,Lowry法测定含量为每皿1858.0 μg.结论:确定超声破碎提取粪肠球菌生物膜蛋白的最优化条件,是一种简单可行测定细菌生物膜中总蛋白含量的方法.

关键词：粪肠球菌、生物膜、超声、蛋白

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分类号：R780.1(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目50578020 国家自然科学基金81000427 上海高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金jdy-07060 上海口腔医学研究所院级基金2011-03

在线出版日期：2013-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：597-600