转录因子Ets-2调控小鼠成釉细胞MMP-20基因表达的研究
目的:通过研究Ets-2转录因子对调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloproteinase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,进一步明确Ets-2在釉质发育中的作用.方法:应用免疫组化方法观察出生后5d小鼠切牙成釉细胞中Ets-2的表达；在小鼠成釉细胞中分别转染200ng pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2和Ets-2 siRNA后,利用实时定量RT-PCR法检测MMP20基因表达的不同变化；用双荧光素酶报告基因检测系统分析Ets-2对MMP-20启动子突变后转录活性的影响.结果:免疫组化显示Ets-2在成釉细胞中呈阳性表达.实时定量RT-PCR研究发现Ets-2过表达后,MMP-20表达水平显著增加；当Ets-2基因沉默后,MMP-20表达水平则显著下降.双荧光素酶报告基因检测系统检测显示,转染pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2的实验组与对照组相比,MMP-20启动子的转录活性升高；对启动子Ets潜在结合部位进行定点突变后,MMP-20启动子的转录活性显著下降,Ets-2丧失上调MMP-20启动子转录活性的作用.结论:小鼠成釉细胞核中Ets-2可通过MMP-20启动子上Ets潜在结合位点,上调MMP-20基因表达水平.
转录因子Ets-2、基质金属蛋白酶-20、免疫组化、RT-PCR、双荧光素酶报告基因检测
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Q132(生物形态学)
国家自然科学基金编号:30973327山东省自然科学基金ZR2010HM076
2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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1-4,8
