两种GTF氨基催化区改良防龋质粒免疫小鼠的实验研究
目的:通过比较编码表兄链球菌葡糖基转移酶氨基催化区CAT不同形式基因序列的两种改良防龋质粒免疫BALB/c小鼠后激发的特异性抗体水平差异,初步评价不同形式CAT在DNA防龋疫苗中的应用潜力.方法:利用分子克隆技术构建两种改良防龋质粒,在靶向防龋DNA疫苗pGJA-P/VAX中插入表兄链球菌OMZ176GTF-I CAT全基因序列构建pGJGAC/VAX;将基因公司合成的共计165bp的串联重复5次的GTF-I氨基催化区核心保守序列克隆到pGJA-P/VAX中构建pGJGA-5C/VAX.转染CHO细胞系,检测其表达.两种改良质粒经鼻腔滴注免疫BALB/c小鼠,检测血清和唾液中的特异性抗PAc,抗GLU和抗CAT抗体水平.结果:重组质粒的基因序列与预期相符.不同形式CAT基因序列的两种改良防龋质粒均可在真核细胞正确表达.pGJGAC/VAX和pGJGA-5C/VAX免疫动物后血清和唾液特异性抗PAc、抗GLU和抗CAT抗体均显著高于空载体pVAX1免疫组(P＜0.05).第10、12和14周,pGJGAC/VAX免疫组小鼠的血清特异性抗CAT抗体显著高于pGJGA-5C/VAX组(P＜0.05).两组间唾液特异性抗体未见显著性差异.pGJGA-5C/VAX在小鼠体内激发特异性抗体的速度较pGJGAC/VAX略快.结论:本实验构建的增加表兄链球菌GTF氨基催化区的两种改良防龋质粒,可在真核细胞中正确表达,两种质粒有效地诱导黏膜和系统体液免疫反应,pGJGAC/VAX和pGJGA-5C/VAX各有优势.
龋齿、疫苗、DNA、表兄链球菌、葡糖基转移酶
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R781.1(口腔科学)
国家自然科学基金资助项目30672325
2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
89-92,96
