hrCEMP1真核表达载体的构建及其在成纤维细胞株中的表达
目的:构建含hrCEMP-1基因真核表达质粒.方法:采用PCR方法扩增hrCEMP1基因,并在两端添加合适的酶切位点;利用定向克隆技术将hrCEMP1基因插入到载体pcDNA3.1中,重组的pcDNA3.1-CEMP1在大肠杆菌DH5α内扩增后,通过酶切电泳鉴定和DNA测序证明质粒构建成功;利用高效率的阳离子聚合物,将经过鉴定的pcDNA3.1-CEMP1转染入NIH3T3细胞中,并以RT-PCR检测hrCEMP1基因的转录.结果:通过对重组质粒pcDNA3.1-CEMP1进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pcDNA3.1-CEMP1构建成功,开放阅读框架正确;转染细胞株的RT-PCR结果中观察到特异性242 bp片段.结论:成功构建含hrCEMP-1基因真核表达质粒pcDNA3.1-CEMP1,并可在NIH3T3细胞株中mRNA水平表达.
牙骨质蛋白、真核表达载体、NIH3T3 细胞株
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R781.4(口腔科学)
江苏省"六大人才高峰"资助项目苏人通[2008]329号;江苏省自然科学基金项目BK2010118;南京市医学科技发展重点项目ZKX08017;南京市医学科技发展一般性课题YKK10126
2011-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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