伴放线放线杆菌cdtC基因的克隆及其原核表达载体pET15b-cdtC的构建

摘要：

目的:本实验设计克隆Aa CdtC亚基蛋白的编码基因cdtC并构建其原核表达载体pET 15b-cdtC,为研究CdtC亚基对CDT全毒素功能的分子机制奠定基础.方法:厌氧培养Aa ATCC 29523,提取Aa基因组DNA,PCR反应扩增cdtC基因片段.将此片段克隆入pMD 19-T Vector,经限制性内切酶BamHI和Xho I酶切得到粘性末端cdtC片段,克隆入原核表达载体pET 15b中.结果:产物经PCR初步鉴定后进行DNA序列分析,测序结果与Genbank公布序列一致性达100%.结论:本实验成功克隆了cdtC基因,并成功构建了其原核表达载体pET 15b-cdtC.为深入研究CdtC亚基以及CDT全毒素分子作用机制奠定基础.

关键词：伴放线放线杆菌、基因克隆、cdtC、原核表达载体

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分类号：R781.4(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金项目30700942;江苏省高校自然科学基础研究面上项目07KJB320076;教育部留学回国人员启动基金

在线出版日期：2010-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：153-156