TGF-β1、EGFP双基因修饰骨髓间充质干细胞的体外实验研究

摘要：

目的:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,检测其在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,为研究基因修饰细胞回植后的迁移转归及成骨作用提供实验基础.方法:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,p TGF-β1-IRES2-EGFP与pIRES2-EGFP分别转染BMSCs, 并设空白对照.荧光显微镜和细胞免疫组化分别检测GFP和TGF-β1的表达.结果:成功地构建含TGF-β1基因和EGFP基因的真核表达载体.G418筛选10～15 d后有抗性克隆形成.p TGF-β1-IRES2-EGFP转染组抗性克隆中,GFP表达的同时有TGF-β1的表达,而部分抗性克隆(约20%)中有TGF-β1表达的却无GFP表达.pIRES2-EGFP转染组的抗性克隆中有EGFP表达,但无TGF-β1表达.结论:利用IRES构建的含TGF-β1基因和GFP基因的双顺反子真核表达载体,能在部分BMSCs中同时获得表达,可以作为TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后追踪其成骨作用的方法.

关键词：转化生长因子β1、增强型绿色荧光蛋白、骨髓间充质干细胞

所属期刊栏目：23

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：湖北省武汉市科技攻关项目20036004

在线出版日期：2007-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：28-31