变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因在大肠杆菌中的表达及纯化

摘要：

目的:在大肠杆菌中表达变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因(glucan binding protein B,gbpB),并对重组蛋白进行初步纯化,为下一步制备多抗和进行相关的研究奠定基础.方法:将克隆到的gbpB全长编码区基因克隆到表达载体pPROEXTMHTb,构建表达质粒pPROEXTMHTb-gbpB,以大肠杆菌E. coli BL21(DE3)为宿主菌进行诱导表达,表达产物经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化.结果:工程菌经IPTG诱导3 h后,在SDS-PAGE上出现一条新的蛋白条带,相对分子量(Mr)为4.5～5.0×103,以可溶形式存在,经Ni-NTA柱纯化后获得纯度较高的重组葡聚糖结合蛋白B.结论:获得Mr为4.5～5.0×103的重组葡聚糖结合蛋白B.

关键词：变形链球菌、葡聚糖结合蛋白B、基因表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：20

分类号：R781(口腔科学)

在线出版日期：2004-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：340-342