脐静脉内皮细胞外泌体和内皮祖细胞外泌体对hDP SCs增殖及迁移能力的比较研究

摘要：

目的 将人脐静脉内皮细胞外泌体(human umbilical vein endothelial cells?derived exosome,HUVECs?exo)和内皮祖细胞外泌体(endothelial progenitor cells?derived exosome,EPCs?exo)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖和迁移能力的影响进行比较研究,以期为外泌体在牙髓再生中的应用积累经验.方法 采用超速离心法分离提取外泌体,透射电镜观察外泌体形态,纳米粒子跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis,NTA)检测外泌体粒径大小,Western blot蛋白印迹检测外泌体标志蛋白CD9、CD63、TSG101的表达.将两种外泌体按照5、10、20μg/mL浓度梯度分别作用于hDPSCs,通过CCK?8实验检测hDPSCs增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测hDPSCs迁移能力.结果 透射电镜下观察两种外泌体均呈圆盘状,粒径集中在30～150 nm,阳性表达CD9、CD63、TSG101三种标志蛋白.与对照组(Control组)相比,两种外泌体在不同浓度下均对hDPSCs增殖能力无显著促进作用,差异无统计学意义(P>0.05).细胞划痕实验和Transwell实验表明,与对照组相比,两种外泌体均可促进hDPSCs迁移,差异有统计学意义(P<0.05),其中10μg/mL外泌体浓度作用效果最明显(P<0.01).相同浓度的两种外泌体组间作用效果差异无统计学意义(P>0.05).结论 本实验成功分离提取到两种细胞来源的外泌体并进行鉴定,将不同浓度的两种细胞来源的外泌体作用于hDPSCs,发现对其增殖能力无明显促进作用,但可以促进其迁移,尤以10μg/mL外泌体浓度促进迁移效果最为明显.

关键词：脐静脉内皮细胞、内皮祖细胞、人牙髓干细胞、外泌体、牙髓再生

所属期刊栏目：42

分类号：R349.5(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：口腔疾病研究国家重点实验室专项SKLOD2021?OF05

在线出版日期：2022-12-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：979-983,989