"壳-芯"结构电纺纤维膜对MC3T3-E1细胞体外早期成骨分化的影响

摘要：

目的 研究载有骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)、聚己内酯(polycaprolactone,PCL)"壳芯结构"静电纺丝纤维膜(PP-B)对MC3T3-E1细胞体外早期成骨分化的影响.方法 通过同轴静电纺丝的方法制备PLGA/PCL-BMP-2纤维膜(PP-B),以不含BMP-2的PLGA/PCL电纺纤维膜(PP)为对照组.通过透射电子显微镜观察PP-B膜的"壳-芯"结构;用ELISA法检测BMP-2的体外释放行为;收集PP-B膜的浸出液培养细胞,用碱性磷酸酶(ALP)活性检测法检测其释放的BMP-2对MC3T3-E1细胞的影响;将MC3T3-E1细胞接种到纤维膜上,通过CCK-8法检测1 d、3 d、5 d、7 d的增殖情况;以碱性磷酸酶(ALP)活性为早期骨向分化指标,检测其7 d的活性;用实时荧光定量逆转录PCR检测细胞接种7 d时成骨指标Bmp2、Alp、Col1、Msx2、Runx2的表达.结果 透射电镜结果表明,同轴静电纺丝法制备的PP-B静电纺丝可形成连续均一的"壳-芯"结构;ELISA结果显示,PP-B膜可以实现BMP-2的持续释放;ALP活性检测结果证实本实验条件下制备的负载BMP-2的同轴静电纺丝支架能保持生长因子的部分活性.CCK-8结果显示PP-B膜和PP膜上的MC3T3-E1细胞在1、3、5、7 d都持续增殖;ALP活性检测及染色结果显示PP-B膜上的MC3T3-E1细胞的ALP活性高于PP膜(P<0.05);实时荧光定量逆转录PCR结果显示接种在PP-B膜上的MC3T3-E1细胞的相关成骨基因Bmp2、Alp、Col1、Msx2、Runx2的表达高于PP膜(P<0.05).结论 本实验制备的PP-B膜能促进MC3T3-E1细胞在体外的早期成骨分化.

关键词：骨形态发生蛋白-2、同轴静电纺丝、组织工程支架、成骨分化

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分类号：R783.1(口腔科学)

资助基金：国家重点研发计划纳米科技重点专项2016YFA0201704/2016YFA0210700;江苏省高校优势学科建设工程资助项目2014-37

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：485-490