miR-503靶向作用RECK调控口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和凋亡的机制研究

摘要：

目的:通过研究miR-503靶向回复引导半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元(reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs,RECK)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)进展中的作用.方法:将人OSCC细胞SCC-4分为NC inhibitor组(转染miR-503 inhibitor阴性对照序列)、miR-503 inhibitor组(转染miR-503 inhibitor)、si-NC组(转染RECK siRNA阴性对照序列)、si-RECK组(转染RECK siRNA)、miR-503 inhibitor + si-NC组(共转染miR-503 inhibitor和RECK siRNA阴性对照序列)和miR-503 inhibitor + si-RECK组(共转染miR-503 inhibitor和RECK siRNA).实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测miR-503和RECK在各组SCC-4 细胞及永生化人口腔角质形成细胞RT7 中的表达;Western blotting检测RECK蛋白的表达;TargetScan预测miR-503 的靶基因并通过双荧光素酶报告基因检测来验证miR-503 与RECK的靶向关系;CCK-8 和EdU染色检测各组细胞的增殖能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测各转染组细胞凋亡情况.结果:相比RT7 细胞,miR-503 在SCC-4 细胞中高表达(P＜0.05),RECK则呈低表达(P＜0.05);与NC inhibitor组相比,miR-503 inhibitor组细胞中RECK mRNA及RECK蛋白的表达水平均显著升高(P＜0.05);TargetScan数据库及荧光素酶报告基因分析显示了RECK 和 miR-503 之间的靶向关系(P＜0.01),提示miR-503 可靶向抑制RECK的表达;与NC inhibitor组相比,miR-503 inhibitor组SCC-4 细胞的增殖能力、侵袭能力均显著下降(P＜0.05),而细胞的凋亡则显著增加(P＜0.01),抑制miR-503 表达降低了OSCC细胞的增殖、侵袭并加速凋亡;与si-NC组相比较,si-RECK组细胞增殖、侵袭能力均显著增加(P＜0.05),而细胞凋亡能力显著下降(P＜0.05),敲低RECK增加了OSCC细胞的增殖、侵袭并降低凋亡;与miR-503 inhibitor + si-NC组相比较,miR-503 inhibitor + si-RECK组细胞中RECK mRNA的表达水平和细胞凋亡能力均显著下降(P＜0.05),细胞增殖、侵袭能力显著增加(P＜0.05),敲低RECK可削弱miR-503 inhibitor对OSCC细胞生物学行为的抑制作用.结论:miR-503 在OSCC细胞中表达上调,抑制miR-503 可削弱其对靶基因RECK的下调,从而降低肿瘤细胞的增殖与侵袭能力,并促进细胞的凋亡.

关键词：miR-503、回复引导半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元、靶向调控、口腔鳞状细胞癌、增殖、侵袭、凋亡

所属期刊栏目：33

分类号：R782(口腔科学)

在线出版日期：2023-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：305-313