Hmcn1对MC3T3-E1细胞体外成骨分化、迁移及增殖影响的实验研究

摘要：

目的:研究Hemicentin1(Hmcn1)基因对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1 cells)成骨、迁移及增殖能力的影响.方法:体外培养MC3T3-E1细胞,对其进行成骨诱导,诱导后第0、3、7、14 天时收样,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)观察Hmcn1的表达量变化.使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染MC3T3-E1 细胞,构建Hmcn1 敲降的MC3T3-E1细胞,采用RT-qPCR检测敲降效率.采用RT-qPCR检测敲降前后骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、成骨细胞特异性转录因子(Osterix,OSX)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子 2(Runt related transcription factor 2,Runx2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达水平的变化.通过ALP和茜素红S(alizarin red S,ARS)染色观察Hmcn1 敲降对MC3T3-E1 细胞成骨分化的影响.通过细胞划痕实验和Transwell实验观察Hmcn1 敲降对MC3T3-E1 细胞迁移能力的影响.通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK8)实验观察Hmcn1 敲降对MC3T3-E1 细胞增殖能力的影响.结果:对MC3T3-E1 细胞进行体外成骨诱导后,Hmcn1 基因的表达出现上调.使用siRNA敲降Hmcn1基因后,BMP-2表达下调.敲降Hmcn1后,MC3T3-E1细胞的迁移能力下降,增殖能力提高,ALP染色敲降组细胞着色较少.结论:Hmcn1 基因可通过上调BMP-2 的表达,促进MC3T3-E1 细胞的迁移,抑制MC3T3-E1 细胞的增殖,促进MC3T3-E1 细胞体外成骨分化.

关键词：Hmcn1、MC3T3-E1细胞、成骨分化、骨形态发生蛋白-2

所属期刊栏目：33

分类号：R782(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金;国家重点研发计划;中央高校基本业务费专项

在线出版日期：2023-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：77-82