MicroRNA-143-3p靶向RANK对牙髓干细胞凋亡及分化能力的影响

摘要：

目的:探究microRNA-143-3p(miR-143-3p)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)凋亡及分化能力的影响及其作用机制.方法:分离hDPSCs,并转染miR-143-3p抑制物(inhibitor)或核因子 κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),通过流式细胞术检测细胞凋亡情况,对细胞进行成骨分化诱导后通过茜素红染色评估分化情况,分别用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、RANK、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)mRNA及蛋白表达,双荧光素酶实验分析miR-143-3p与RANK的靶向关系.结果:miR-143-3p在hDPSCs中的表达与RANK呈反向调控关系,抑制miR-143-3p的表达增加了细胞凋亡率,促进了细胞成骨分化,提高了RANK、RANKL、Runx2、OCN、ALP、BMP2的mRNA和蛋白表达水平,降低了OPG的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),而沉默RANK则抑制了miR-143-3p inhibitor的作用(P<0.05).双荧光素酶实验提示,RANK是miR-143-3p的靶基因.结论:miR-143-3p通过靶向RANK激活OPG/RANKL轴调节hDPSCs的凋亡及成骨分化.

关键词：人牙髓干细胞、miR-143-3p、核因子κB受体活化因子、凋亡、分化

所属期刊栏目：32

分类号：R782(口腔科学)

资助基金：河南省医学科技攻关计划联合共建项目LHGJ20190201

在线出版日期：2022-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：209-216