10.3969/j.issn.1005-4979.2015.03.004
非病毒载体介导pBMP-2转染MC3T3-E1细胞的体外成骨分化研究
目的:探讨非病毒载体GenEscortTM II介导质粒骨形态发生蛋白2(pBMP-2)转染对MC3T3-E1细胞增殖和体外成骨分化的影响。方法:以非病毒载体GenEscortTM II介导报告基因质粒增强型绿色荧光蛋白(pEGFP)转染MC3T3-E1细胞,优化转染条件,荧光显微镜和流式细胞仪评价转染效率。 pBMP-2转染MC3T3-E1细胞后,MTT法检测细胞增殖情况,染色法检测碱性磷酸酶(ALP)和茜素红S(ARS)的表达,Real-time PCR 分析成骨细胞标志基因ALP、骨涎蛋白(BSP)、Runt 相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的表达。结果: GenEscortTM II介导pEGFP转染MC3T3-E1细胞后,转染效率达35.02±4.42,MTT结果示基因转染对细胞增殖无影响(P>0.05)。pBMP-2转染组的ALP、ARS表达较pEGFP转染组和未转染组显著,同时Real-time PCR检测结果示,转染后6 d, pEGFP转染组和未转染组相比,pBMP-2转染组的成骨基因ALP、BSP、Runx2、OCN、OPN的表达量差异有显著性意义(P<0.05)。结论:非病毒载体GenEscortTM II介导BMP-2转染MC3T3-E1细胞可诱导其向成骨方向分化。
非病毒载体、聚乙烯亚胺、MC3T3-E1细胞、骨形态发生蛋白2、成骨分化
R782(口腔科学)
国家自然科学基金30772431
2015-07-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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179-184