介孔硅纳米微粒共转运阿霉素和shRNA对耐药口腔鳞癌细胞株的作用

摘要：

目的：考察介孔二氧化硅纳米微粒(mesoporous silica nanoparticle，MSNP)共转运体系逆转肿瘤多药耐药、杀伤肿瘤细胞的效果，证实阿霉素（doxorubicin，DOX）与MDR1shRNA共同应用具有协同抗肿瘤作用。方法：首先采用溶胶-凝胶法制备MSNP，通过表面修饰阳离子聚合物聚乙烯亚胺（polyethylenimine，PEI）使其带有正电荷，能够与带负电的MDR1shRNA相结合，同时将抗肿瘤药物DOX吸附于介孔内部，形成载药、载基因的共转运体系。体外采用紫外可见光分光光度法测定载药量；通过MTT法测定DOX对口腔鳞癌细胞株KB及耐药株KBV的半抑制浓度IC50；使用荧光显微镜、流式细胞仪测定转染效率；应用Real-Time PCR技术检测MDR1基因的表达水平；AnnexinV-FITC/7-AAD双染法经流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：纳米粒度仪、透射电镜测得所合成的MSNP尺寸为100~200 nm，表面介孔直径约3~5 nm，分散性较好，尺寸较均一；紫外分光光度计法测得IC50(KB-DOX)=182.9 ng/mL、IC50(KBV-DOX)=9233.5 ng/mL，计算耐药株KBV的耐药倍数为50.483871倍；荧光显微镜、流式细胞仪测得转染效率为6.73％；Real-Time PCR结果显示：与单纯载药、载基因组相比，双载组MDR1基因的表达水平显著下调；Annex-inV-FITC/7-AAD双染法经流式细胞仪测得单纯载药、单纯载基因组细胞凋亡率分别为12.74％、10.08％，而双载组细胞凋亡率增加到25.68％。结论：介孔二氧化硅纳米微粒共转运体系能够有效逆转肿瘤多药耐药，与单纯载药、载基因组相比，同时应用DOX与MDR1shRNA具有协同抗肿瘤作用。

关键词：介孔二氧化硅纳米微粒、共转运、DOX、MDR1shRNA

分类号：R782;R739.8(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金资助课题81320108011,81271111

在线出版日期：2015-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：172-178