10.3969/j.issn.1005-4979.2015.02.004
釉基质蛋白对大鼠脂肪源性干细胞体外成骨分化能力的实验研究
目的:通过配制不同浓度的釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)培养液,体外培养SD大鼠脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs),初步探究EMPs对ADSCs体外增殖活性及成骨分化能力的影响。方法:酶消化法获得大鼠脂肪间充质细胞,通过流式细胞仪技术分离、筛选干细胞,多向诱导分化对所得细胞进行鉴定;乙酸法制备EMPs干粉并通过蛋白免疫印记技术鉴定其成分,配制不同浓度的诱导液以备用;采用MTT法检测EMPs对ADSCs增殖活性的影响,并用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹的方法检测EMPs诱导ADSCs成骨分化标志物的mRNA及蛋白表达变化情况。结果:釉基质蛋白(EMPs)对大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs)的增殖具有明显的促进作用(P<0.05),并呈现剂量和时间依赖性; EMPs培养ADSCs 14 d后,成骨分化标志物Runx-2、Osteocalcin(OCN)、Collagen (Col-I)在mRNA和蛋白水平表达均增加,并且与EMPs成正比(P<0.05)。结论:釉基质蛋白可作为一种成骨诱导剂,能有效增强大鼠脂肪源性干细胞体外增殖活性并诱导其成骨分化。
釉基质蛋白、脂肪源性干细胞、细胞增殖、成骨分化
R782.2;R318(口腔科学)
2015-05-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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