骨髓基质干细胞-196℃保存的初步研究

摘要：

目的:探索适合于人骨髓基质干细胞(marrow stromal cells,MSCs)-196℃冷冻保存的条件和方法.方法:体外分离培养人MSCs,以含不同浓度二甲亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)的冻存液和不同浓度的细胞在液氮中保存.3个月后复苏接种培养,观察细胞形态、存活率和贴壁率;通过3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入实验比较细胞分裂增殖能力;3H-脯氨酸(3H-Proline)掺人实验检测胶原合成能力:RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和骨钙素(osteocalcin,OC)mRNA表达.结果:不同DMSO浓度保存MSCs复苏后的细胞形态和功能有所不同,其中含5%DMSO冻存液组保存效果最差,15%组最佳.15%DMSO冻存液组复苏后MSCs的形态与未冻存组相似,存活率为(86±5)%,贴壁率为(82±3)%.MSCs保持较强的分裂增殖和胶原合成能力,Ⅰ型胶原和骨钙素mRNA表达与5%或10%DMSO冻存液组比较有显著性差异(P＜0.05).冻存MSCs浓度为(5～10)×106个/mL组复苏后细胞存活率明显优于(1～2.5)×106个/mL组.结论:含15%DMSO的冻存液适合于MSCs长期保存,高浓度组MSCs冻存效果优于低浓度组.

关键词：骨髓基质干细胞、培养、冻存、二甲亚砜

所属期刊栏目：17

分类号：Q813(生物工程学(生物技术))

资助基金：解放军医学科研项目06MA081

在线出版日期：2008-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：316-319