10.12259/j.issn.2095-610X.S20231017
EZH2抑制剂与膀胱癌GC化疗药物联用增敏的作用研究
目的 探究多梳蛋白zeste基因増强子类同源物2(histone methyltransferase enhancer of Zeke 2,EZH2)抑制剂对膀胱癌治疗中吉西他滨联合顺铂(gemcitabine and cisplatin,GC)化疗方案中的增敏作用.方法 首先构建 EZH2 siRNA敲低系,然后使用qPCR与WB检测验证siRNA在膀胱癌UCC细胞中的表达水平.根据不同的处理分为对照组(膀胱癌T24 细胞正常培养)、GC化疗组(T24 细胞+GC化疗药物)、si EZH2 转染组(T24 细胞+si EZH2 转染+GC化疗药物)、GSK126 抑制剂组(T24 细胞+GSK126 5 μM+GC化疗药物)、UNC1999 抑制剂组(T24 细胞+UNC1999 5 μM+GC化疗药物)、EI1 抑制剂组(T24 细胞+ EI1 5 μM+GC化疗药物)、DZNep1 抑制剂(T24 细胞+DZNep1 5 μM+GC化疗药物)与EPZ005687 抑制剂(T24 细胞+EPZ005687 5 μM+GC化疗药物),采用CCK-8、平板克隆形成与Annexin/PI等实验分别检测 8 组细胞增殖率、凋亡率及其对细胞周期影响.随后将 30 只BALB/C雌裸鼠随机分为对照组(膀胱癌T24 细胞正常培养)、T24 细胞+ EZH2 抑制剂的溶媒缓冲液组、T24 细胞+GC化疗组、T24 细胞+UNC1999 EZH2 抑制剂组与T24 细胞+ UNC1999 EZH2 抑制剂+GC化疗组,每组 6 只.裸鼠成瘤实验检测转染后各组UCC细胞移植瘤的生长情况,免疫组化染色法观察移植瘤组织中Ki67和EZH2 的表达,血常规检测白细胞、红细胞及血小板数量裸鼠骨髓抑制情况.结果 在已转染了siRNA质粒的T24 细胞中,siEZH2-1 与siEZH2-2 在siRNA与蛋白表达水平上与对照组的差异有统计学意义(P<0.01).在细胞实验中,与对照组相比,上述 7 组实验组通过CCK-8、平板克隆与Annexin V/PI双染、Pi单染实验发现EZH2 抑制剂可以抑制T24 细胞的增殖、迁移和侵袭能力,早期凋亡细胞比例上调(P<0.01).其中在平板克隆实验中,实验组T24 细胞+EPZ005687 5 μM+GC化疗药物组细胞克隆数与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).小鼠体内实验表明,与对照组相比,经GC化疗药物或EZH2 抑制剂的裸鼠瘤体重量减少(P<0.05),并且在血常规检测中血细胞含量也有所增高.结论 EZH2 抑制剂能够提高膀胱癌GC化疗方案的敏感性,从而降低膀胱癌细胞的增殖、迁移与裸鼠体内移植瘤的生长.同时,联合用药也能够显著减少其骨髓抑制情况.提示协同治疗在膀胱癌化疗增敏中具有一定的作用.
膀胱癌、多梳蛋白zeste基因増强子类同源物2、GC化疗
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R737.14(肿瘤学)
云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目202001AY070001-077
2023-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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