miR-130b-3p促进人牙源性iPSCs重编程的作用

摘要：

目的 研究hsa-miR-130b-3p对人DPSCs重编程为iPSCs的影响.方法 设计合成LV3(H1/GFP&Puro)-hsa-miR-130b-3p-mimics质粒,Lipofectamine 3000将质粒转染到人DPSCs,荧光显微镜观察细胞,RT-qPCR验证转染效率.Sendai reprogramming kit将2组DPSCs重编程为iPSCs(实验组为miR-130b-3p-DPSCs,对照组为DPSCs),对比2组iPSCs克隆形态和重编程效率,RT-PCR检测Oct4、Nanog、KOS、Klf4、c-Myc的表达.结果 hsa-miR-130b-3p过表达质粒转染48 h后在DPSCs内有明显表达,证实高效的转染效率(P<0.01).Sev重编程得到的2组iPSCs均呈现为扁平致密的圆形克隆,边缘清晰平滑,集落内细胞形态均一、核质比较大,RT-PCR结果表明2组细胞均可表达干细胞特异标志物Oct4和Nanog,同时外源性病毒SeV或转录因子KOS/Klf4/c-Myc不再表达.实验组的重编程效率高于对照组(分别为0.037％和0.018％,P<0.05).

关键词：牙髓干细胞、重编程、诱导性多能干细胞、微小RNAs、过表达

所属期刊栏目：43

分类号：R781(口腔科学)

资助基金：云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目;云南省高层次卫生计生技术人才培养经费基金资助项目

在线出版日期：2023-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：18-22