银杏叶提取物对活化血小板诱导HCAECs氧化应激的作用及其机制

摘要：

目的：利用活化血小板诱导血小板刺激人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells， HCAECs)，建立离体氧化应激模型。探讨不同剂量的银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract，EGb）对细胞内NADPH氧化酶4（NOX4）及RhoA的表达及对细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)的产生所形成的影响。方法用内皮细胞培养基特供胎牛血清（加入内皮细胞生长添加剂）于37℃、5% CO2细胞培养箱中培养细胞，用第6代细胞进行实验。将HCAECs随机分为5组：生理盐水对照组，活化血小板组，4、40、400μg/ml EGb实验组。除对照组外，其他4组细胞用2×108/ml的活化血小板刺激12 h后，实验组细胞再分别用不同剂量的EGb干预12 h。用DCFH-DA探针检测细胞内ROS的产生，用荧光显微镜观察；用Western Blot技术检测细胞内NOX4和RhoA的表达。结果荧光显微镜观察结果显示，活化血小板刺激HCAECs后，与生理盐水对照组相比，ROS产生明显增加（P＜0.05）；与活化血小板组相比，EGb对ROS产生的抑制作用呈剂量相关（P＜0.05）。Western Blot结果显示，与生理盐水对照组相比，活化血小板刺激HCAECs后，NOX4和RhoA的表达量增加（P＜0.05）；与活化血小板组相比，EGb对NOX4表达的抑制作用呈剂量相关性（P＜0.05），对RhoA表达有抑制作用（P＜0.05），但不呈剂量相关性。结论 EGb能抑制体外培养的活化血小板诱导的HCAECs内ROS、NOX4和RhoA的表达，EGb治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的机制可能是通过协同抑制NOX4和RhoA的表达，从而使ROS表达量减少，抑制细胞内的氧化应激反应。

关键词：动脉粥样硬化、活化血小板、活性氧、NADPH氧化酶4、RhoA

所属期刊栏目：32

分类号：R714.252(妇产科学)

资助基金：首都医学发展科研基金SF200JII06

在线出版日期：2016-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：246-251