五种重组人源IL-18突变子表达质粒的构建及其在BxPC-3细胞中的表达

摘要：

目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础.方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平.结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功；(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体；(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达.

关键词：pEGFP-C1、hIL-18、BxPC-3细胞、突变子

所属期刊栏目：28

分类号：R394.3

资助基金：浙江省自然科学基金Y2080889,Y2080506;博士点基金20090101110121;浙江省教育厅项目Y200805242;浙江中医药大学校级课题一般项目17108015

在线出版日期：2012-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：68-74,83