溶藻弧菌铁调蛋白基因的克隆、表达及其特征分析

摘要：

铁为一切有机体所必需.对铁摄取与利用的调控在细菌生长和铁毒性中起重要作用.在革兰氏阴性细菌中,铁摄取调节蛋白(Fur)主管铁的代谢.溶藻弧菌是人和海洋动物共感染的一种主要病原弧菌.本研究克隆表达了溶藻弧菌的fur基因,并分析了其相关特征.该基因序列全长994 bp,其中包含450 bp的开放读码框,编码150个氨基酸残基的蛋白,推导的相对分子量为16.78 kD.在编码序列的上下游,RBS序列、-10序列、-35序列和二个潜在的转录终止子分别得到确定,但没有发现存在于大肠杆菌fur基因中的"铁盒子".氨基酸序列的中段从G46位至D104位,为高度保守区域,其中包括含组氨酸丰富铁结合模型(H3-D-H-L-V-C-L-D-C-G).SDS-PAGE分析表明,fur基因可在大肠杆菌中大量表达,带His-Tag的重组融和蛋白经镍亲和层析得到纯化,Western-blot分析结果显示,Fur蛋白具有免疫反应性.为进一步研究Fur蛋白的结构与功能打下基础.

关键词：溶藻弧菌、fur基因、克隆、表达、特征分析

所属期刊栏目：23

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浙江省科技厅资助项目2005C23085

在线出版日期：2007-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：651-657