鸡白细胞介素18全长基因的克隆、表达及分子进化分析

摘要：

根据鸡白细胞介素18(IL-18)cDNA基因序列设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术,从脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的我国地方品种萧山鸡原代鸡脾细胞中扩增并克隆鸡IL-18全长基因(Genbank accession,AY628648).扩增片段全长591 bp,共编码197个氨基酸的前体蛋白,其中含有表达完整功能蛋白所必需的起始密码子和终止密码子.该序列与国外报道的鸡IL-18全长基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性为98.99%,只在引导序列中出现两个氨基酸残基的缺失,分子进化分析表明萧山鸡IL-18基因与火鸡以及家鸭基因形成一个独立的分支.将萧山鸡IL-18成熟蛋白序列插入pGEX-4T-2载体并在E.coli中得到表达,获得45 kD的GST-IL-18融合蛋白,经纯化后用于制备多克隆抗体.本研究对萧山鸡白细胞介素18的全长基因进行了克隆及表达,并对其分子进化进行了分析,为深入研究其功能奠定了基础.

关键词：鸡白细胞介素18、克隆、序列分析、分子进化

所属期刊栏目：23

分类号：Q95(动物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划101-j99-02;浙江省科技计划011102465;浙江省自然科学基金ZA0105

在线出版日期：2007-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：52-57,101