幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建

摘要：

目的构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM-CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3'端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBIA1300的表达框架内.结果 PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBIA1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础.

关键词：生物工程、幽门螺杆菌、cagA基因、CTB基因、水稻Wx启动子、基因融合、植物表达载体

所属期刊栏目：20

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浙江省自然科学基金ZA 0213;浙江省医药卫生科技计划2001 ZD 004

在线出版日期：2004-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：189-193