家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂20的表达特征分析
【目的】原核表达家蚕Bombyx mori丝氨酸蛋白酶抑制剂20(Serine proteinase inhibitor 20, BmSerpin-20),分析 BmSerpin-20基因和蛋白组织表达分布特点,以及不同外源病原物刺激家蚕后BmSerpin-20基因的表达模式。【方法】利用 pET-28a 表达载体在大肠杆菌 Transetta(DE3)中融合表达BmSerpin-20蛋白,利用纯化的重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,利用实时定量PCR技术及Western blot方法分别分析BmSerpin-20基因和蛋白的组织表达水平,以及病原物免疫刺激后的表达模式。【结果】在大肠杆菌中正确表达和纯化了融合 BmSerpin-20蛋白,并制备了多克隆抗体;BmSerpin-20基因和蛋白在脂肪体、中肠、血细胞、马氏管、表皮、睾丸、卵巢中均有表达,且在表皮中表达量最高;家蚕5龄幼虫经核型多角体病毒(Nuclear polyhedrosis viruses)、藤黄微球菌Micrococcus luteus、大肠杆菌Escherichia coli、白僵菌Beauveria bassiana处理后,BmSerpin-20基因表达量先下调而后上调,但不同病原物在不同时间的影响不尽相同。【结论】研究了BmSerpin-20基因和蛋白的表达模式,为下一步研究其在家蚕免疫系统中的作用奠定了基础。
家蚕、丝氨酸蛋白酶抑制剂、诱导表达、表达分析
R28;R73
Supported projects现代农业产业技术体系建设专项基金CARS-22-SYZ10;安徽省自然科学基金项目1308085QC60;安徽农业大学引进和稳定人才项目YJ2013-8
2015-09-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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