粉蚧标本保存与DNA提取方法的比较
【目的】探讨适合粉蚧的标本保存及DNA提取方法。【方法】采用改良CTAB法、改良SDS法、GenMagBio动物细胞组织/细胞基因组磁珠法以及GeneJET Genomic DNA纯化试剂盒法4种方法分别对新鲜活体4℃、无水乙醇﹣20℃和无水乙醇4℃3种保存方式且保存一年以上的扶桑绵粉蚧Phenacoccus solenopsis 成虫进行 DNA 提取,并对不同提取方法所获取的 DNA 纯度与质量浓度进行分析比较验证。【结果】3种保存方式中,新鲜活体效果最好,其次为无水乙醇-20℃。无水乙醇4℃效果和无水乙醇﹣20℃无明显区别,均存在一定程度的降解。对于新鲜活体标本,以CTAB法提取的DNA质量最高,其次为GenMagBio磁珠法和SDS法,GeneJET试剂盒法最差;对于无水乙醇﹣20℃和4℃保存时间较长的标本,磁珠法提取的DNA质量明显优于其余3种方法。【结论】无水乙醇﹣20℃可用于粉蚧长期保存,可满足后续分子研究需要;改良 CTAB 法对新鲜粉蚧成虫 DNA 提取效果较好,磁珠法对长时间保存 DNA存在一定程度降解的粉蚧成虫效果较好。
扶桑绵粉蚧、保存方式、DNA提取、CTAB法、磁珠法
S43;S66
Supported projects国家“十二五”科技支撑计划课题2012BAK11B03;国家质检总局科技项目2014IK023;苏州市地方科技项目SNG201430
2015-09-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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