棉铃虫Polycalin基因的克隆及其表达分析
【目的】通过对棉铃虫 Polycalin 基因的克隆及其表达谱分析，进一步明确 Polycalin 基因在抗性中发挥的作用，为棉铃虫Helicoverpa armigera的抗性治理提供理论依据。【方法】通过RACE结合PCR技术克隆获得了棉铃虫Polycalin基因的全长序列，利用实时荧光定量PCR技术测定了在棉铃虫不同发育时期、幼虫肠道不同部位的Polycalin基因表达量，比较了棉铃虫取食含Cry1Ac蛋白的饲料后，Polycalin基因表达量的变化。【结果】该基因全长序列为2955 bp，开放阅读框为2781 bp，编码926个氨基酸（GenBank登录号为KP100652）；预测蛋白的分子量为101.68 ku，等电点为4.57。推导的氨基酸序列中， N末端含有20个氨基酸组成的信号肽，含有8个 O-糖基化位点，3个 N-糖基化位点，C末端存在2个GPI结合位点。Polycalin在棉铃虫所有发育阶段都可以表达，幼虫期表达量较高，尤其在1~3龄幼虫体内表达量最高，在卵、成虫和蛹中的表达量较低。棉铃虫4龄幼虫取食含活化Cry1Ac蛋白的人工饲料后， Polycalin基因的表达受到抑制。【结论】研究结果可以为进一步揭示Polycalin基因的功能及其在Bt杀虫机制中的作用奠定基础。
棉铃虫、Polycalin基因、表达、Bt
S85;R28
Supported projects国家转基因生物新品种培育重大专项课题2014ZX08011-007**
2015-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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