显微注射构建烟粉虱的RNAi技术体系

摘要：

RNAi已经成为揭示基因功能的一个常用的有力工具.在昆虫RNAi技术体系中,通过显微注射方法向昆虫体内注入 dsRNA,实现系统性干扰,是最为广泛采用的方法.但对于体型较小的昆虫,注射法操作存在较大的难度,特别是非常微小的昆虫烟粉虱Bemisia tabaci.为了进行烟粉虱大规模基因功能验证,需要开发一套成熟的RNAi技术体系.本研究以烟粉虱的CYP6CM1基因为目标基因,通过显微注射法注射不同浓度的dsRNA到烟粉虱4龄若虫,荧光定量PCR检测其沉默效果.结果表明:在对单头烟粉虱注射50 nL时,注射不同浓度的dsRNA,对CYP6CM1基因的沉默效果不同,最大沉默效率可达到80%以上.因此,本实验成功构建了烟粉虱的RNAi技术体系,也可用于其它粉虱类害虫的RNAi技术.

关键词：RNA干扰、显微注射、烟粉虱、dsRNA、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：52

分类号：R45;R57

资助基金：国家863计划2012AA101502;国家自然科学基金31171857;北京室重点实验室2012年阶梯计划项目Z121106002812038;蔬菜有害生物控制与优质栽培北京市重点实验室

在线出版日期：2015-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：504-509