10.7679/j.issn.2095-1353.2014.088
五龄飞蝗不同发育时间实时定量PCR内参基因的筛选
【目的】筛选5龄飞蝗不同发育时间的最适内参基因,为相关研究提供基础数据。【方法】本文选取β-肌动蛋白(β-actin)、延长因子(EF-1α)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、核糖体蛋白49(RP49)、α-微管蛋白(α-Tubulin)和18S核糖体RNA(18S rRNA)基因作为候选内参基因,运用实时定量PCR(qPCR)方法研究各基因在5龄飞蝗不同发育时间的相对表达量,用geNorm与Normfinder软件分析这6个基因表达稳定性。【结果】geNorm分析结果显示6个内参基因表达稳定度M值顺序为:β-actin(0.3720)>RP49(0.3750)>α-Tubulin(0.4030)>18S rRNA(0.4270)>EF-1α(0.4970)>GAPDH(0.6040)。M值越小表示基因表达稳定度越高,同时geNorm软件以标准化因子配对差异值(Pairwise variations)0.15默认为取舍值,由于 V2/3=0.098<0.15,所以最适内参基因数目为2个。运用 NormFinder软件也得出相似的结果。【结论】β-actin与RP49为5龄飞蝗不同发育时间的最适内参基因。
飞蝗、实时定量PCR、内参基因、geNorm、NormFinder
S18;S81
国家自然科学基金资助项目31272380,31201710;山西省高等学校留学回国人员科研资助项目201163
2014-06-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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