间接竞争ELISA法对柞蚕微孢子虫的检测

摘要：

柞蚕微孢子虫病是柞蚕唯一的检疫性病害,其致病病原物为柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi Ding,Su&Wen),因此,柞蚕微孢子虫的检测对于该病的防治具有重要意义.本文通过制备柞蚕微孢子虫多克隆抗体,建立柞蚕微孢子虫间接竞争ELISA检测法.结果表明,柞蚕微孢子虫多克隆抗体效价为1∶104、浓度为3 mg·mL-1,主要由2条大小约50 ku和25 ku蛋白条带组成,可作为后续试验多克隆抗体材料.间接竞争ELISA法最佳抗原工作浓度为2.0 μg· mL-1微孢子虫孢壁蛋白溶液,最佳抗体工作浓度为兔抗血清按1∶102倍浓度稀释,酶标二抗最佳工作浓度为1∶5×104倍稀释,柞蚕微孢子虫间接竞争ELISA检测法的灵敏度为1.6×105 spores·mL-1.间接竞争ELISA法在柞蚕微孢子虫的检测方面具有一定的应用价值.

关键词：柞蚕微孢子虫、酶联免疫吸附测定、多克隆抗体、检测

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资助基金：现代农业产业技术体系建设专项CARS-22;辽宁省教育厅科研项目L2010512;沈阳农业大学校青年基金项目201010002

在线出版日期：2013-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1364-1370