10.7679/j.issn.2095-1353.2013.166
舞毒蛾几丁质酶基因的真核表达与重组病毒的获得
几丁质是昆虫外骨骼和围食膜的重要组成部分,鉴于几丁质酶在昆虫生长发育过程中发挥着举足轻重的作用,应用昆虫几丁质酶为探索新的生物防治害虫的方法提供了途径.本文分别根据苜蓿银纹夜蛾Autographacalifornica核型多角体病毒多角体蛋白基因序列和编码舞毒蛾Lymantria dispar Ⅰ型几丁质酶基因的开放阅读框设计引物,使用聚合酶链反应扩增出以上两个基因,全长分别为783 bp和1 737 bp.构建重组质粒pFastBac-LdCht和pFastBac-AcPH-LdCht,转化大肠杆菌DH10Bac后获得重组穿梭载体,通过脂质体介导转染Sf9细胞产生重组杆状病毒AcMNPV-AcPH--LdCht和AcMNPV-LdCht,分别用于表达蛋白和获得重组病毒.细胞成功表达出有活性的舞毒蛾几丁质酶,并在棉铃虫体内扩增得到重组病毒.研究为深入了解昆虫几丁质酶性质提供依据,并为应用重组病毒奠定基础.
生物防治、舞毒蛾、基因克隆、几丁质酶、重组杆状病毒
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国家自然科学基金31101490;山西省青年科技研究基金2010021031-2;太原市科技项目120164087
2013-11-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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