小菜蛾血淋巴蛋白质双向电泳技术体系的建立及优化

摘要：

采用不同方法对小菜蛾Plutella xylostella(L.)血淋巴进行双向电泳研究,建立了一套适用于小菜蛾血淋巴蛋白质组分析的双向电泳体系.从样品处理方案、等电聚焦时间、染色方法等因素对小菜蛾双向电泳结果的影响进行了分析和优化.结果表明,TCA/丙酮沉淀法提取蛋白损失少,图谱均匀清晰,分辨率和重复性更高.不同长度胶条的最佳上样量不同,胶条长度为7、17、24 cm时,最佳上样量依次为20～50 μg、50～300 μg、100～500μg,而聚焦时间则分别以24 000、50 000、65 000 vhr为宜.第二向聚丙烯酰胺凝胶的浓度以12%为宜,电泳后蛋白点呈均匀分布.银染的灵敏度明显高于考马斯亮蓝染色,可以检测出更多的蛋白点,但考马斯亮蓝染色在后续蛋白点质谱鉴定中具有优势.

关键词：双向电泳、蛋白质组学、小菜蛾

所属期刊栏目：48

分类号：S433.4(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金项目30300042;浙江省自然科学基金项目Y307551

在线出版日期：2011-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：332-337