粘虫β-actin基因cDNA的克隆、序列分析及表达量检测

摘要：

β-actin基因作为actin家族的一员,在基因定量实验中常用作内参基因.本实验运用RT-PCR和RACE技术,以粘虫Mythimna separata(Walker)cDNA为模板,对β-actin基因进行克隆获得全长cDNA序列,并利用生物信息学方法,对β-actin基因全长cDNA序列及推测得到的β-actin蛋白序列进行分析.结果表明,获得的粘虫核β-actin基因cDNA序列长度为1 472 bp,其中包括68 bp的5'非编码区、273 bp的3'非编码区和1 131 bp的开放阅读框,编码一个376个氨基酸蛋白,具有actin蛋白家族典型特征.推测得到的粘虫β-actin蛋白理论分子量为41.7497 ku,等电点为5.29,富含6种类型的特定功能位点.该蛋白序列与其他动物β-actin蛋白序列具有97.9%～99.7%高度同源性.β-actin表达量检测结果显示β-actin在6种不同组织间表达无显著差异(P>0.05),表明β-actin可作为研究粘虫不同基因表达水平高低的可靠内参基因.该基因的cDNA序列已经递交GenBank并获得登录号为GQ856238.

关键词：粘虫、β-actin基因、克隆

所属期刊栏目：47

分类号：Q96(昆虫学)

资助基金：陕西省教育厅科研计划项目D6JK156

在线出版日期：2011-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1089-1094