甘蓝夜蛾和八字地老虎肌动蛋白基因的克隆与序列分析

摘要：

肌动蛋白是细胞骨架微丝的主要组成成分,在肌肉收缩、细胞骨架形成、细胞移动等方面起重要作用.以鳞翅目夜蛾科昆虫甘蓝夜蛾Mamestra brassicae L.和八字地老虎Agrotis c-nigrum 3龄幼虫整个虫体为材料提取总RNA,利用RT-PCR和eDNA末端快速扩增技术(RACE),分别扩增得到2种昆虫的肌动蛋白的cDNA序列,甘蓝夜蛾肌动蛋白的cDNA序列含有1 441个碱基,而八字地老虎肌动蛋白的cDNA序列含有1 411个碱基.2种昆虫的该基因的cDNA序列均包括1个1 131个碱基的开放阅读框,编码1个含376个氨基酸的蛋白.甘蓝夜蛾肌动蛋白分子量约为41.8 kDa;八字地老虎肌动蛋白分子量约为41.9 kDa.Prosite软件分析结果表明,甘蓝夜蛾和八字地老虎肌动蛋白氨基酸序列中存在3个肌动蛋白特征片段.GenBank数据库搜索及序列比对结果表明,甘蓝夜蛾肌动蛋白属于肌肉特异型肌动蛋白,八字地老虎肌动蛋白属于细胞质特异型肌动蛋白.2个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号,甘蓝夜蛾肌动蛋白cDNA序列登录号为EU035314,八字地老虎肌动蛋白cDNA序列登录号为EU035315.利用RT-PCR技术在八字地老虎4龄、5龄、6龄幼虫、蛹期4个不同发育阶段和6龄期的肠道、体壁、脂肪体3种不同组织中都检测到了肌动蛋白基因在mRNA水平的表达.

关键词：克隆、序列分析、肌动蛋白、甘蓝夜蛾、八字地老虎

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分类号：S43;S4

资助基金：黑龙江省自然科学基金项目C2007-7;黑龙江省教育厅科学技术研究项目11521020;东北农业大学科学研究基金

在线出版日期：2010-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：884-890