西伯利亚蝗基因组DNA提取及RAPD分析条件的优化

摘要：

以西伯利亚蝗Gomphocerus sibiricus(L.)为研究材料,利用改良的SDS法提取高质量的DNA,分别测试了dNTP浓度、镁离子浓度、Taq DNA聚合酶用量、模板DNA的量等因素对反应结果的影响.通过各因子的组合比较,建立了西伯利亚蝗RAPD优化体系:25μL PCR反应体系,10×buffer 2.5 μL;dNTP 0.24 mmol/L;MgCl2 2.0 mmol/L;Taq DNA聚合酶1 U;DNA模板45 ng;引物30 ng.扩增程序为:94℃预变性1 min 45 s、94℃变性30 s、35 ℃退火1 min 30 s、72℃延伸2 min,45个循环、72℃延伸10 min.结果表明,利用优化的反应条件进行西伯利亚蝗基因组DNA分析,实验有着良好的重复性和稳定性.

关键词：随机扩增多态性DNA、基因组DNA、西伯利亚蝗、巴里坤地区

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分类号：Q96(昆虫学)

资助基金：国家自然科学基金30460028;新疆高校科研项目XJEDU2005123;XJEDU2004S20

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：505-508