棉铃虫c-Jun氨基末端激酶基因的克隆、表达谱及对UV-A胁迫的响应
[目的]本研究旨在克隆棉铃虫Helicoverpa armigera c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)基因,并对其进行序列和表达模式分析,探讨该基因在棉铃虫生长发育及响应UV胁迫方面的作用.[方法]利用RT-PCR与RACE技术克隆棉铃虫JNK基因,并利用生物信息学方法对其编码的氨基酸序列进行分析;采用实时荧光定量PCR技术检测其在棉铃虫不同发育阶段(卵、1-6龄幼虫、蛹、雌雄成虫)、成虫不同组织(去除触角和复眼的头、胸、腹、触角、复眼、足、翅、中肠、卵巢)中及雌成虫在UV-A照射不同时间(0,30,60,90,120和150 min)下的相对表达量变化.[结果]克隆获得一个棉铃虫JNK基因并命名为HaJNK(GenBank登录号:MH719009),其cDNA序列全长为2 431 bp,开放阅读框(ORF)长1 191 bp,编码396个氨基酸,编码蛋白质的相对分子量为45.01 kD,等电点为6.35,无跨膜结构,无信号肽.系统进化分析显示,棉铃虫HaJNK与其他昆虫JNK具有很高的同源性.发育阶段表达分析表明,HaJNK在棉铃虫卵期表达量最高;组织特异性分析显示该基因在成虫复眼、胸部及卵巢部位特异性表达.UV-A照射能诱导棉铃虫雌成虫体内HaJNK的表达,随着照射时间的延长,其表达量呈现先升高后降低的趋势,在照射60 min时表达量达到峰值.[结论]HaJNK在棉铃虫不同龄期、成虫不同组织和UV-A照射不同时间的雌成虫中差异表达,提示其在响应UV-A胁迫的分子机制中具有重要意义.
棉铃虫、c-Jun氨基末端激酶、基因克隆、表达分析、UV-A胁迫
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Q966(昆虫学)
国家重点研发计划2017YFD0200900;国家自然科学基金项目31401754;贵州省农业攻关项目黔科合NY字[2012]3007号
2019-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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