二化螟Minus-C气味结合蛋白的分子克隆及功能鉴定
气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫对寄主气味的感受中起重要作用,但有关Minus-C OBP及其功能的报道很少.本研究通过基因组数据分析并利用RACE技术,克隆和鉴定了二化螟Chilo suppressalis (Walker)的一个Minus-C OBP基因,命名为CsupOBP1(GenBank登录号:KC492498).CsupOBP1基因的开放阅读框长423 bp,编码141个氨基酸,其中N端的18个氨基酸为预测的信号肽序列,成熟蛋白序列中具有4个保守的半胱氨酸位点.实时定量PCR分析显示,该基因在幼虫头部及成虫雌雄足、翅和雄性触角等化感组织中高表达,其中在雄虫触角内的表达量显著高于雌虫触角.利用荧光竞争结合实验对CsupOBP1重组蛋白与38种化合物的结合特性的测定表明,重组CsupOBP1与β-紫罗兰酮的结合能力最强(Ki =9.53 μmol/L).触角电位测定表明,二化螟成虫可对β-紫罗兰酮产生显著的触角电生理反应,但雄虫反应明显强于雌虫,与结合试验及雄虫触角中CsupOBP1的表达量显著高于雌虫触角的测定结果相一致.鉴于β-紫罗兰酮是水稻等植物中普遍存在的一种芳香气味组分,推测CsupOBP1可能通过对该气味的结合和运输,从而在二化螟对寄主植物的嗅觉定向中起作用.
二化螟、气味结合蛋白、触角电位、组织表达谱、β-紫罗兰酮、荧光竞争结合实验
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Q966(昆虫学)
农业部行业科技专项201303017;国家自然科学基金项目31071978
2013-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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