家蚕转基因载体pBacA3EG的构建及其表达

摘要：

以家蚕Bombyx mori肌动蛋白A3(actin 3)启动子、增强性绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因及SV40的多聚腺苷酸识别序列为元件,经多次克隆,将其插入到piggyBac转座载体中.经PCR、酶切鉴定及测序表明各元件已按正确的方式插入到piggyBac载体中.将构建好的piggyBac表达载体显微注射到胚盘形成前期的蚕卵中,在胚胎早期发育的第3天,通过体视荧光显微镜检测到蚕卵内发出较强的绿色荧光.结果表明该载体构建正确且能在蚕卵中进行表达.家蚕转基因载体的体外瞬时表达不但是成功进行家蚕转基因所必需的第一步,而且其自身也可以应用于基因的功能研究,为家蚕后基因组研究奠定了基础.

关键词：家蚕、转基因、A3启动子、piggyBac、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：48

分类号：Q966(昆虫学)

资助基金：国家自然科学基金30270691,30330460;国家高技术研究发展计划863计划2004AA2Z1020

在线出版日期：2005-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：799-803