意蜂工蜂酸性磷酸酶的纯化及其酶学特性

摘要：

从意蜂Apis mellifera工蜂体内分离提纯酸性磷酸酶(ACPase,EC3.1.3.2),并对其性质进行了研究.将工蜂酸性磷酸酶的初提物经分段盐析、DEAE-Sepharose FF离子交换层析及Sephdex G-200凝胶过滤等纯化步骤,得到经聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一蛋白区带的酶液.提纯倍数为77.24,酶液比活力为16.22 U/mg(对硝基苯磷酸二钠作底物).利用凝胶过滤法测定酶的相对分子质量为135 kD,SDS-PAGE测定酶的亚基相对分子质量为63.1 kD.酶的等电点为4.46和4.79.非还原/还原(NR/R)单向、双向SDS-PAGE显示酶分子含有链内二硫键.对二级结构圆二色谱分析显示,酶分子中α-螺旋占13.84%,β-折叠占25.68%,无规则卷曲占56.34%.氨基酸组成分析结果表明,酸性磷酸酶约含有507个氨基酸残基,富含门冬氨酸残基.

关键词：意蜂工蜂、酸性磷酸酶、分离纯化、性质

所属期刊栏目：47

分类号：Q556(酶)

在线出版日期：2004-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：310-315