FFPE组织HPV检测中PCR-反向点杂交技术的应用:两种核酸提取方法的比较

摘要：

目的 比较两种不同核酸提取方法在人乳头瘤病毒(HPV)亚型检测中的应用,为实验室选择相应的核酸提取方法来获得有效的HPV结果提供依据.方法 收集25例浸润性宫颈癌福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织标本,采用粗提法和纯化法两种核酸提取方法提取DNA标本,并通过检测DNA浓度、纯度及内参β-Globin来评估DNA质量.将提取的DNA经PCR扩增后,应用PCR-反向点杂交法检测HPV亚型,分析两种提取方法HPV检测结果的有效性及一致性.结果 两种提取方法均能获得适量的DNA用于HPV检测,粗提法较纯化法可获得较高的DNA浓度(P<0.05),但存有一定有机物及蛋白质污染.纯化法较粗提法获得的DNA纯度更高(P<0.05).将粗提法和纯化法提取的DNA用于检测HPV感染,总HPV阳性率分别为92％和96％.采用粗提法提取的DNA标本高危型HPV(HR-HPV)阳性率低于纯化法(92％vs.96％),但单一型HPV16阳性率高于纯化法(44％vs.36％);与纯化法相比,粗提法提取的DNA无法检测出更多型别的混合感染,而FFPE组织标本经纯化法分离后可检测出HPV33、HPV53、HPV58等多型别感染.结论 采用粗提法和纯化法进行FFPE组织核酸提取,均可获得足量DNA用于HPV亚型检测,且HR-HPV阳性率达90％以上.粗提法具有操作简便、耗时较短、成本较低等优势,能够获得有效的HPV结果,但对于HPV多型别感染的检测表现欠佳.

关键词：福尔马林固定石蜡包埋组织、人乳头瘤病毒、宫颈癌、PCR-反向点杂交法

所属期刊栏目：19

分类号：R711.74(妇产科学)

在线出版日期：2022-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2203-2206,2210