10.3969/j.issn.1672-9455.2017.03.010
SHH信号通路对肝癌细胞Hep3B中血管内皮生长因子表达的影响
目的 研究sonic hedgehog(SHH)信号通路对肝癌Hep3B细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的调控.方法 对Hep3B肝癌细胞设计VEGF基因的特异性引物,将扩增的基因片段克隆到T载体PMD19-T上,构建标准品质粒并建立标准曲线,建立实时荧光定量PCR(RT-PCR)的检测方法 .后将Hep3B肝癌细胞分为对照组和研究组处理,对照组为空白对照,研究组采用特异性抑制剂cyclopamine阻断肝癌细胞中的SHH通路,均采用实时荧光定量PCR方法 及免疫印迹试验两种方法 测定VEGF的表达量.结果 RT-PCR显示,SHH通路特异性抑制剂cyclopamine可明显下调肝癌Hep3B细胞中VEGF mR-N A表达(研究组与对照组分别为10.728±0.186、18.506±0.395,P<0.05),同时免疫印迹试验检测结果 提示V EG F蛋白表达也明显降低(研究组与对照组分别为0.84±0.09、0.33±0.07,P<0.05).结论 cyclosporine可抑制肝癌Hep3B中VEGF的表达,VEGF可能为SHH通路调控的下游基因之一.
血管内皮生长因子、sonichedgehog信号通路、cyclopamine、实时荧光定量聚合酶链式反应
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R73;R81
2017-03-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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