10.3969/j.issn.1005-7234.2023.04.002
葛根素通过调控miR-214抑制脊髓损伤后神经元炎症反应及凋亡的实验研究
目的 探讨葛根素是否通过介导miR-214抑制过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的脊髓神经元炎症反应及凋亡.方法 体外培养大鼠脊髓神经元细胞,以H2O2刺激构建脊髓神经元损伤模型,实验分为:Con组、H2O2组、H2O2+Pue组、H2O2+Pue+anti-miR-NC 组和 H2O2+Pue+anti-miR-214 组.实时荧光定量 PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测各组miR-214的表达,CCK-8法检测细胞活性,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,酶联免疫吸附测定法分析肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1 β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法(Western blot)检测裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)表达水平.结果 与Con组相比,H2O2组细胞活性、SOD活性和miR-214的表达显著降低,细胞内ROS水平、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量、凋亡率、Cleaved caspase-3的表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+Pue组细胞活性、SOD活性和miR-214的表达明显升高,细胞内ROS水平、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量、凋亡率、Cleaved caspase-3的表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);抑制miR-214能够逆转葛根素对H2O2诱导的脊髓神经元细胞的损伤保护作用.结论 葛根素能够通过上调miR-214的表达抑制H2O2诱导的脊髓神经元细胞凋亡和炎症反应,对脊髓神经元细胞损伤起保护作用.
葛根素、miR-214、脊髓神经元细胞、凋亡、炎症反应
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R744(神经病学与精神病学)
2023-09-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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