基于微流控芯片的核酸样本前处理方法实验研究

摘要：

构建一种快速免提取核酸释放剂并开发与之匹配的微流控芯片,用于RNA类核酸样本检测的前处理.将表面活性剂Surfactin、蔗糖、Triton X-100、Chelex-100、BSA和无酶无菌水配制成核酸释放剂,并在此基础上设计配套的微流控芯片;采用新型冠状病毒假病毒标准品结合下游RT-RPA检测和RT-PCR检测对几种成分的配比及反应条件进行优化,并评价核酸释放剂的灵敏度、稳定性及其在微流控芯片上的效果.本研究所述的核酸释放剂仅需约 10 min即可完成核酸样本的释放,处理后的样本RT-RPA检测限可达 1 000 copies/mL,RT-PCR检测限可达 200 copies/mL;室温放置 22 天后释放效果未见明显降低;本研究设计的微流控芯片仅需一台简单的离心设备即可运行,主要结构包括样本腔、混匀通道和孵育腔 3 个部分,配合核酸释放剂使用仍可保持较高的检测灵敏度,处理后的样本RT-PCR检测限为 200 copies/mL.本研究所述核酸释放剂稳定性较高,且具有较高的检测灵敏度,与微流控芯片组合使用可实现快速、简便、低成本的核酸检测样本前处理.

关键词：核酸释放剂、一步法裂解、微流控芯片、RNA类病毒、现场快速检测

所属期刊栏目：33

分类号：R183;R373(流行病学与防疫)

在线出版日期：2023-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：64-71