应用转LUX报告基因重组发光菌监测评价DNA损伤毒性污染物
为研究对DNA损伤污染物MNNG、MMC特异性响应作用,构建2株分别含有PUCD-uvrA、PUCD-alkA载体的重组发光菌THSH1711及THSH1712.uvrA、alkA PCR产物经双酶切后与PUCD615载体连接,测序结果表明,基因已正确插入到PUCD615的多克隆位点,方向和读码框正确,重组载体构建成功.THSH1711及THSH1712均对MNNG及MMC有特异响应作用.2菌株对MNNG的响应起始浓度均为5 mg/L,最佳反应浓度为50 mg/L,在3.5~5.5h达到反应高峰,超过该浓度则反应效应下降.THSH1711对MMC的响应起始浓度为0.1 mg/L,最佳反应浓度为5 mg/L,在作用3h后达到反应高峰.相比之下,THSH1712对MMC的反应较弱,需MMC浓度达到10 mg/L以上才有反应.构建重组发光菌用于水质等毒性污染物检测,具有快速、经济、稳定可靠等优点,能实现连续在线及自动化检测,达到早起预警目的,发展前景广阔.
LUX基因、重组发光菌、DNA损伤、毒性污染物
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Q789(基因工程(遗传工程))
上海市自然科学基金15ZR1414700;国家质检总局科技项目2016IK221;长三角科技合作项目17395810102;清华大学国家重点联合实验室开放基金16K03ESPCT
2018-03-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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