一种真鲷虹彩病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

真鲷虹彩病毒一直被世界动物卫生组织列入必报疫病病原目录,该病毒与传染性脾肾坏死病毒在基因序列上没有区别。为了快速检测病原,本文根据传染性脾肾坏死病毒主要衣壳蛋白序列中一段基因保守区设计引物和TaqMan探针,建立了真鲷虹彩病毒特异性实时荧光定量PCR检测方法,并利用PCR反应扩增出的衣壳蛋白基因制备了pGEM-T/真鲷虹彩病毒重组质粒作为标准阳性对照。经试验,反应在模板量102-106拷贝浓度范围内有较好的线性关系,检测限最低可达100拷贝数,而且与流行性造血器官坏死病毒、甲鱼虹彩病毒等6种水生动物病毒无交叉反应。结果证明该方法具有简便、快速、敏感、特异等特点,它的建立为该病诊断与病原检测提供了一个重要手段。

关键词：鱼类病毒病、真鲷虹彩病毒、主要衣壳蛋白、实时荧光定量PCR、TaqMan探针

所属期刊栏目：21

分类号：Q784;S941.419(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局科技项目2008IK010;2006IK013;中国检验检疫科学研究院基础科研业务经费项目2008JK004

在线出版日期：2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：38-41,59