巢式-多重RT-Reahime PCR检测马铃薯Y病毒脉坏死株系的方法

摘要：

马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Y vein necrosis strain,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害.本研究根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RDRP)基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一条TaqMAN荧光探针,建立了巢式-多重RT-Real-time PCR检测PVYn的新方法.该方法采用E.Z.N.ATM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术.实验结果表明,本方法检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Real time PCR等方法高.该方法检测灵敏度可达3fg/μL植物总RNA.利用四对引物和一条TaqMAN探针对PCR阳性产物进行确认,检测的准确性比其它方法高.

关键词：马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)、巢式-多重RT-Reahime PCR、检测

所属期刊栏目：19

分类号：TP2;TU5

资助基金：山东检验检疫局课题:马铃薯重要病毒类病害实时荧光PCR检测技术研究SK13-2004

在线出版日期：2009-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：8-11